液氮冷凍研磨機(jī)在浙二醫(yī)院完成動(dòng)物內(nèi)臟研磨前處理實(shí)驗(yàn)
凈信在浙二醫(yī)院使用液氮冷凍研磨機(jī)研磨動(dòng)物內(nèi)臟研磨前處理工作時(shí),用戶就提出了自己的一些使用疑慮,借此機(jī)會(huì)凈信也分享給大家,以便大家借鑒經(jīng)驗(yàn),減少研磨失誤。例如:動(dòng)物內(nèi)臟在什么情況下需要使用液氮冷凍,什么時(shí)候不需要液氮冷凍?
此次在處理動(dòng)物內(nèi)臟使用的是剛從冰箱中冷凍過(guò)的內(nèi)臟,因此,可以采用液氮冷凍研磨機(jī)進(jìn)行液氮研磨(操作時(shí)需要加入緩沖液研磨,一來(lái)有助于保護(hù)樣本,二來(lái)可以幫助化凍,三來(lái)是可以研磨更均勻,效果更好)。
但是當(dāng)研磨的樣品是新鮮的動(dòng)物內(nèi)臟時(shí)則不可以采用凍液氮的方法(主要原因是內(nèi)臟內(nèi)的水分太多,液氮無(wú)法使其徹底脫水,反而會(huì)結(jié)很硬的冰)。
此次實(shí)驗(yàn)選用儀器: 上海凈信液氮冷凍研磨機(jī)
儀器介紹:液氮冷凍研磨機(jī) JXFSTPRP-L系列,進(jìn)口電機(jī)、防腐材質(zhì)、增強(qiáng)型運(yùn)動(dòng)軸等多種提升。通過(guò)研磨球在研磨儀內(nèi)來(lái)回高速撞擊及摩擦,能在非常短的時(shí)間內(nèi)將土壤、植物和動(dòng)物的組織/器官、細(xì)菌、酵母、真菌、孢子、古生物標(biāo)本等樣品完成研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁。特殊的三維一體震動(dòng)模式,更完美的研磨方式,樣本研磨更徹底,穩(wěn)定性更好。
客戶背景: 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院(簡(jiǎn)稱“浙大二院”)創(chuàng)建于1869年,為浙江省西醫(yī)發(fā)源地,是全國(guó)首批三級(jí)甲等醫(yī)院、首批國(guó)家區(qū)域醫(yī)療中心建設(shè)單位(心血管病、創(chuàng)傷、骨科(培育)、神經(jīng)疾?。ㄅ嘤憬∥ㄒ坏?ldquo;自然指數(shù)”全球百?gòu)?qiáng)醫(yī)院。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>動(dòng)物內(nèi)臟組織研磨,本次實(shí)驗(yàn)對(duì)象為小鼠的肝、腸、脾、肺,要求研磨的很細(xì)提高蛋白及RNA的濃度,涉及到蛋白、RNA提取還需要低溫研磨,因?yàn)橛刑崛∫?,所以溫度不能太低,否則凍住液體無(wú)法研磨,經(jīng)過(guò)比較推薦,最終客戶選擇上海凈信研磨儀處理樣品。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、準(zhǔn)備金屬適配器一套,離心管和研磨珠。
2、預(yù)冷模塊,把金屬適配器放到液氮或冰箱中預(yù)冷?! ?/p>
3、取適量動(dòng)物組織、研磨珠、提取液一起放入離心管中,每管加一顆研磨珠,蓋子蓋上?! ?/p>
4、將完成預(yù)冷后的金屬模塊取出,放入研磨儀中固定(適配器底部與軸的卡槽互相卡牢)放平后將離心管分別放入適配器對(duì)應(yīng)孔位,(注意平面配平,對(duì)稱放樣)蓋上適配器蓋,旋緊螺帽?! ?/p>
5、設(shè)置頻率和時(shí)間(根據(jù)組織類型以及量微調(diào)),開(kāi)始研磨?! ?/p>
6、磨好后打開(kāi)儀器取出離心管,即可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)
(動(dòng)物組織裝管圖和研磨效果圖)
上圖為1-2分鐘的研磨效果,細(xì)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出老師的預(yù)期。之前也在其他實(shí)驗(yàn)室體驗(yàn)過(guò)我們儀器,經(jīng)過(guò)我們銷售人員協(xié)助搭配研磨珠也達(dá)到很好的效果。之前所有樣品都是福爾馬林浸泡,實(shí)驗(yàn)周期非常長(zhǎng),所以選用凈信研磨儀代替人工處理。效率高,效果好,非常符合老師的需求。
注意事項(xiàng):
1、按照組織的種類和量來(lái)選擇研磨珠能達(dá)到最好的效果,有不清楚的及時(shí)問(wèn)上海凈信銷售人員。
2、往金屬適配器里放離心管時(shí)注意平面配平,保證適配器壓蓋在水平線上。
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