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地址:上海市松江區(qū)曹農(nóng)路5弄40號(hào)冷凍組織研磨儀研磨藥用植物三七實(shí)驗(yàn)步驟及效果展示
前言:三七樣品中提取DNA,中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院之前采用研缽手工研磨的方法,在研缽內(nèi)倒入液氮,在凍干狀態(tài)下快速研磨,研磨過(guò)程中樣品不易研磨,整體研磨樣品不充分,影響實(shí)驗(yàn)效果,因此選擇上海凈信冷凍研磨儀。
三七是我國(guó)重要的藥用植物之一,又名田七,人參三七等,為五加科人參屬植物,是我國(guó)傳統(tǒng)名貴藥物,自古就有“止血神藥”的美稱。距今已有400多年的應(yīng)用歷史,在國(guó)內(nèi)外久負(fù)盛名。三七主產(chǎn)于云南文山。品種缺乏是三七種植存在的重要技術(shù)問(wèn)題,育種標(biāo)記和方法則是困擾三七育種的重要問(wèn)題,這與我們對(duì)三七的遺傳基礎(chǔ)缺乏了解有關(guān)。
研究發(fā)現(xiàn),三七是在9100萬(wàn)年前與茄科植物馬鈴薯和辣椒分化開來(lái),三七與四倍體的人參屬植物人參和西洋參有9383個(gè)共同的基因,976個(gè)特有的轉(zhuǎn)錄本.,基因組測(cè)序的完成將為三七全基因組選擇育種、功能基因的發(fā)現(xiàn)等提供了基礎(chǔ),也有利于三七產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題的解決。
實(shí)驗(yàn)材料和器具:
樣品:三七
工具:凈信冷凍研磨儀(JXFSTPRP-CL-24)
耗材:鋼罐,研磨珠、液氮、剪刀、鑷子等
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、準(zhǔn)備鋼罐2個(gè),研磨珠若干顆;
2、取三七組織剪成小塊與研磨珠一同放入鋼罐中,將蓋子擰緊;
3、將鋼罐置于裝有液氮的容器內(nèi),液氮容量沒(méi)過(guò)鋼罐即可,冷凍若干分鐘,取出時(shí)戴手套或使用鑷子夾取避免液氮凍傷;
4、將適合器放入研磨儀器中固定好,然后開機(jī)并將制冷功能打開進(jìn)行預(yù)冷
5、將浸泡過(guò)液氮的鋼罐放置適合器內(nèi),樣品盡量對(duì)稱放置,以保證研磨時(shí)的受力平衡,旋緊垂直定位螺旋,將安全鎖扣緊。設(shè)置參數(shù),程序結(jié)束后即可得到破碎粉末;
6、研磨完畢后請(qǐng)關(guān)閉電源,將安全鎖歸位;
7、完成后續(xù) DNA 提取步驟。
注意事項(xiàng):
1、每支鋼罐內(nèi)的樣品量一般不超過(guò)罐體體積的三分之二,樣品量過(guò)多會(huì)影響研磨效果。
2、樣品盡量對(duì)稱放置,以保證研磨時(shí)的受力平衡。
3、樣品夾取過(guò)程中戴手套及使用鑷子夾取避免液氮凍傷。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程、結(jié)果圖示:
實(shí)用儀器介紹:
此款儀器為上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司生產(chǎn)的全新全自動(dòng)樣品冷凍研磨儀,它是一種特殊的、快速的、高效率的、多試管的一致系統(tǒng)。可以在較短的時(shí)間內(nèi)、 低溫狀態(tài)下完成對(duì)各種樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁,以保留蛋白質(zhì)活性。
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