多樣品組織研磨機(jī)研磨酵母菌實(shí)驗(yàn)步驟|沈陽市微生物研究所

　　此次使用多樣品組織研磨機(jī)進(jìn)行研磨實(shí)驗(yàn)的樣品為酵母菌，主要生長(zhǎng)在偏酸性的潮濕的含糖環(huán)境，在自然界分布廣泛。酵母是基因克隆實(shí)驗(yàn)中常用的真核生物受體細(xì)胞，培養(yǎng)酵母菌和培養(yǎng)大腸桿菌一樣方便。酵母克隆載體的種類也很多。

　　酵母菌是一類單細(xì)胞真菌的統(tǒng)稱，酵母菌具有以下幾個(gè)基本特征：個(gè)體一般以單細(xì)胞狀態(tài)存在；多數(shù)以出芽方式繁殖，也有的進(jìn)行裂殖或產(chǎn)生子囊孢子；能發(fā)酵多種糖類；細(xì)胞壁常含有甘露聚糖；喜在含糖較高、酸性的環(huán)境中生長(zhǎng)。

　　實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：沈陽市微生物研究所

　　實(shí)驗(yàn)材料和器具：

　　樣品：酵母菌

　　儀器：上海凈信多樣品組織研磨機(jī)（Tissuelyser-24）

　　實(shí)驗(yàn)步驟：

　　1. 預(yù)先將凈信樣品研磨儀Tissuelyser-24制冷金屬適配器放入冰箱

　　2. 準(zhǔn)備好離心管，陶瓷研磨珠

　　3. 將酵母放入準(zhǔn)備好的離心管中，放入陶瓷珠和裂解液，蓋好離心管蓋子放入金屬適配器中

　　4. 再將金屬適配器裝入凈信研磨儀中，配平擺放，黑色螺旋旋緊

　　5.設(shè)定參數(shù)，啟動(dòng)儀器至研磨程序結(jié)束，即可得到如圖片所示樣品。

　　此次實(shí)驗(yàn)?zāi)康模菏褂枚鄻悠方M織研磨機(jī)來研磨酵母，提取RNA和蛋白，將樣品加裂解液研磨圖片所示，更好的檢測(cè)等一系列實(shí)驗(yàn)。總RNA提取中，除了某些富含多糖多酚的植物組織以及土壤較為困難外，酵母由于其復(fù)雜的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)也給實(shí)驗(yàn)人員造成不小的麻煩。

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