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地址:上海市松江區(qū)曹農(nóng)路5弄40號(hào)多樣品組織研磨儀研磨破碎黃芪實(shí)驗(yàn)
本研究從富含多糖和次生物質(zhì)的黃芪干燥根提取高質(zhì)量的基因組DNA,為今后黃芪遺傳多樣性、分子鑒定研究奠定基礎(chǔ)。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.把準(zhǔn)備好的黃芪樣品剪切成小塊,
2.將樣本放入50ml鋼罐中,放入凈信多樣品組織研磨儀上
3.設(shè)置參數(shù)研磨頻率55HZ,時(shí)間25 s就可研磨成粉狀,
4.從凈信研磨儀上取出樣本,溶解后做后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
樣品研磨前 樣品研磨后
采用改良的CTAB法、高鹽低pH法、SDS法、苯酚法等9種提取液提取黃芪干燥根的基因組 DNA,結(jié)果表明,CTAB法和高鹽低pH法能得到高質(zhì)量的基因組DNA。用這兩種方法提取9批黃芪干燥根,A260/A280值均在1.8~2.0之 間,瓊脂糖凝膠電泳條帶清晰,降解較少,能有效的從黃芪干藥材中提取到高質(zhì)量的基因組DNA。將DNA以引物5S進(jìn)行PCR擴(kuò)增,獲得清晰的條帶。
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